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酵母雙雜交技術(shù)主要應(yīng)用于驗(yàn)證蛋白與蛋白之間是否互作，既可以在酵母體內(nèi)檢測(cè)兩個(gè)已知的蛋白之間是否互作，也可以通過酵母文庫的構(gòu)建，從文庫中篩選出與己知蛋白互作的未知蛋白，極大的助力于功能基因的研究。本系統(tǒng)也適用于研究蛋白自激活實(shí)驗(yàn)。（酵母雙雜交技術(shù)可用于已知蛋白間的互作驗(yàn)證，亦可用于未知蛋白的篩選和鑒定）
![插圖定稿 [已恢復(fù)]-20](/uploadfile/202504/b0f22c8b0176378.jpg "插圖定稿 [已恢復(fù)]-20")
酵母雙雜交技術(shù)是以酵母的遺傳系統(tǒng)為基礎(chǔ)，重建具有轉(zhuǎn)錄活性和DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域，研究蛋白與蛋白之間相互作用的一種實(shí)驗(yàn)技術(shù)。該系統(tǒng)由DNA結(jié)合結(jié)構(gòu)域(Binding Domain,BD)和轉(zhuǎn)錄激活結(jié)構(gòu)域(Activation Domain、AD)兩個(gè)相對(duì)獨(dú)立的功能結(jié)構(gòu)域組成。其中，BD和AD分別是GAL4蛋白上不同的兩個(gè)結(jié)構(gòu)域(1-147aa和768-881aa)。在利用GAL4系統(tǒng)研究蛋白相互作用時(shí)，BD與誘餌蛋白(Bait)融合，AD與靶蛋白即要捕獲的蛋白(prey)融合,一般情況下單獨(dú)的BD可以與Ga14基因上游活化序列(GAL UAS)結(jié)合但不能引起轉(zhuǎn)錄,單獨(dú)的AD不能與GAL UAS結(jié)合更不會(huì)引起轉(zhuǎn)錄，只有當(dāng)BD-Bait和AD-prey兩個(gè)融合蛋白，在空間上相互靠近且相互結(jié)合時(shí)才能夠與GAL UAS結(jié)合并激活下游報(bào)告基因轉(zhuǎn)錄。
客戶提交實(shí)驗(yàn)材料詳細(xì)信息(候選蛋白序列、順式調(diào)控元件DNA序列等)—客戶提交信息確認(rèn)—構(gòu)建誘餌菌株以及候選蛋白表達(dá)載體—誘餌菌株自激活檢測(cè)及酵母轉(zhuǎn)化—互作篩選及稀釋點(diǎn)種驗(yàn)證—數(shù)據(jù)采集及處理并撰寫提交實(shí)驗(yàn)報(bào)告
（1）提供元件與報(bào)告基因和候選蛋白與AD融合的酵母表達(dá)載體序列信息；
（2）篩選培養(yǎng)后的圖片采集和處理信息；
（3）詳細(xì)的酵母單雜交實(shí)驗(yàn)步驟。
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