-
-
酵母單雜交技術(shù)應(yīng)用于驗證轉(zhuǎn)錄因子與基因上游順式作用元件是否有作用關(guān)系；也可以通過已知的基因上游的順式作用元件，通過酵母單雜交文庫篩選目標(biāo)基因上游的反式作用因子，助力于功能基因的研究。
酵母單雜交技術(shù)是研究蛋白與DNA相互作用的一種分子生物學(xué)實驗技術(shù)。以酵母的遺傳為背景，研究真核生物反式作用因子與DNA互作的一種實驗技術(shù)。該技術(shù)是Prey蛋白與GAL4的激活結(jié)構(gòu)域 (AD)融合，把特定的目的基因順式作用元件與基本啟動子或微小啟動子(mini promoter,Pmin)連接，與下游報告基因結(jié)合；當(dāng)Prey蛋白與目的基因順式作用元件結(jié)合時,激活Pmin轉(zhuǎn)錄，并啟動報告基因表達(dá)。根據(jù)報告基因的表達(dá)情況，就可以反應(yīng)反式作用因子與基因上游順式作用元件是否有作用關(guān)系。
客戶提交實驗材料詳細(xì)信息(候選蛋白序列、順式調(diào)控元件DNA序列等)—客戶提交信息確認(rèn)—構(gòu)建誘餌菌株以及候選蛋白表達(dá)載體—誘餌菌株自激活檢測及酵母轉(zhuǎn)化—互作篩選及稀釋點種驗證—數(shù)據(jù)采集及處理并撰寫提交實驗報告。
（1）提供元件與報告基因和候選蛋白與AD融合的酵母表達(dá)載體序列信息；
（2）篩選培養(yǎng)后的圖片采集和處理信息；
（3）詳細(xì)的酵母單雜交實驗步驟。
-
