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技術(shù)原理
Pull-Down是體外驗證蛋白與蛋白互作關(guān)系的分子生物學實驗技術(shù)之一。該技術(shù)主要原理是將GST融合蛋白作為誘餌蛋白，其可與固定在固相支持物上的GSH(谷胱甘肽)結(jié)合，與蛋白樣品或細胞/組織裂解液共孵育,即可捕獲樣品中與誘餌蛋白互作的蛋白。接著通過洗滌或洗脫過程去除其余物質(zhì)，并將捕獲的蛋白回收，進行WB或質(zhì)譜等檢測分析，從而證實兩種蛋白間的互作關(guān)系或純化出相應的目的蛋白。
技術(shù)應用
Pull-Down技術(shù)可以通過體外分析出蛋白與蛋白之間的互作關(guān)系；可以與酵母雙雜交以及BiFC結(jié)果相互驗證；亦可用于未知蛋白的鑒定。
服務(wù)流程
客戶提交實驗詳細信息(驗證蛋自的ORF序列，蛋白結(jié)構(gòu)等)—對客戶提交信息和材料的確認—構(gòu)建候選蛋白加標簽的原核表達載體—收集和純化候選蛋白—混合和分離候選蛋白—Western Blot檢測—撰寫提交實驗報告。
實驗結(jié)果
（1）提供目標蛋白原核表達載體序列信息；
（2）蛋白的收集和純化詳細實驗步驟；
（3）候選蛋白混合與分離的詳細實驗步驟；
（4）Western Blot檢測結(jié)果。
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